Protocole expérimental de mise en évidence de la spécificité des anticorps : le test ELISA

• 0

  Incubation des anticorps avec l’antigène

  Mise en présence de l’anticorps à tester avec l’antigène.
  

  • Un témoin négatif (anticorps non-spécifique) est réalisé en parallèle (en haut).

  
• 1

  Lavage des puits ELISA

  Les puits sont lavés pour retirer les anticorps qui ne se sont pas fixés spécifiquement à l’antigène.

  
• 2

  Ajout d’un anticorps (anticorps secondaire) reconnaissant la partie constante du premier anticorps

  1. Mise en présence avec des anti-anticorps couplés à une enzyme. 
  2. Lavage comme précédemment.

  
• 3

  Ajout du substrat utilisable par l’enzyme

  • Mise en présence avec un substrat capable de réagir avec l’enzyme couplée à l’anticorps secondaire. 
  • La réaction doit être visible par l’expérimentateur.

  
• 4

  Lecture des résultats et conclusion

  Les puits où il y a eu la réaction sont visibles :
  

  • ce sont ceux où l’anticorps primaire a reconnu l’antigène spécifiquement.